光學活體成像通過在小動物體內植入熒光標記物,利用相對應的激發光使這些標記物發出熒光,實現對生物體內特定細胞或分子非侵入式的精確探測和定量;并通過對影像數據的深度挖掘和分析,深入研究動物模型中與疾病發生、發展相關的生物標志物,以獲得疾病的早期診斷和治療、評估藥物的療效和安全性的關鍵數據。

圖1小鼠結腸癌二維活體成像
銳視二維光學活體成像系統(IMAGING200)掃描成像結果
主要基于光學成像原理,通過特定的光源(如熒光、生物發光等)和高靈敏度的探測器,獲取小動物體內的三維圖像。其基本原理可以概括為以下幾點:
光源的選擇:常用的光源包括熒光染料、熒光蛋白、生物發光等。這些光源可以在特定波長下發出光信號,通過探測器捕捉這些信號,實現成像。
光的傳播與吸收:光在生物組織中的傳播會受到吸收和散射的影響。通過數學模型和算法,可以對這些影響進行校正,從而獲得準確的三維圖像。
多視角成像:為了獲得完整的三維信息,通常需要從多個角度對小動物進行成像。通過計算機算法將多張二維圖像合成三維模型。
光學活體成像需要在近紅外波段(NearInfrared,NIR)進行,因為這個波段的光子在生物體中的吸收較少,具有較好的組織穿透能力。光子在生物體中的吸收過程主要由生物組織中的色素所決定,在可見到近紅外波段,主要的吸收色素包括血紅蛋白(Hb)、氧合血紅蛋白(HbO?)以及水。首先,血紅蛋白和氧合血紅蛋白是血液中的重要成分:血紅蛋白是紅細胞內運輸氧的特殊蛋白質,而氧合血紅蛋白則是血紅蛋白與氧結合后的產物;這兩種色素在不同的波段有特定的吸收特性。其次,水作為生物體的主要成分,會吸收特定波長的光,其吸收特性與水分子的振動和轉動能級有關。光子與這些色素相互作用時,光子能量會被色素分子吸收,并轉化為分子的振動能或電子的激發能,這個過程會影響光在生物組織中的傳播。

圖2小鼠前列腺腫瘤三維活體成像
銳視三維光學活體成像系統(IMAGING200pro)掃描成像結果
衰減系數被用來表征物質對光子吸收能力的強弱,其大小反映了光束傳播單位路徑長度時被吸收的光子數。衰減系數的大小隨光子的波長變化而變化。圖3展示了(氧合)血紅蛋白、水的衰減系數隨入射光子波長的變化。由圖3可見,光子在生物體內的衰減系數在600nm附近出現劇烈下降。因此,為獲得更大的穿透深度,應選擇發光波長較長(>600nm)的熒光,使其能夠在組織內部傳播較遠的距離,獲得更大的成像深度(對小動物而言應達到厘米量級)。

圖3(氧合)血紅蛋白和水的衰減系數隨入射光子波長的變化

隨著技術的不斷進步,小動物三維光學活體成像技術將在以下幾個方面迎來新的發展機遇:
更高分辨率與速度:未來,三維光學成像技術將進一步提高成像分辨率和速度,滿足更多高要求應用場景的需求。
多模態融合:多模態成像技術將成為三維光學成像的重要發展方向。通過結合不同成像技術的優勢,可以實現更全面、更準確的生物過程觀察。
智能化與自動化:隨著人工智能技術的發展,三維光學成像系統將更加智能化和自動化。通過機器學習、深度學習等技術,可以實現自動化的圖像分析和數據處理。